Kompleti za prečišćavanje DNK i RNK
abm nudi raznovrsne specijalizovane komplekte za DNK i RNK koji omogućavaju efikasnu ekstrakciju iz različitih izvora, kao što su životinje, biljke, krv, bakterije i gljive. Takođe možete pronaći pristupačne i pouzdane komplete za rutinske tehnike, poput čišćenja gelova i PCR proizvoda, kao i specijalizovane tehnike, kao što je izolacija cirkularne RNK (circRNA).
Praćenje i vizuelizacija RNK (RNA Mango)
Najnaprednija tehnologija za praćenje RNK, vizuelizaciju i „pull-down” izolaciju
Tehnologija za proučavanje raznovrsnih ćelijskih uloga RNK zaostajala je za alatima razvijenim za proučavanje DNK i proteina, ali inovativni istraživači rade na tome da to promene. Jedan od njih je dr. Peter Unrau sa Univerziteta Simon Fraser. On i njegov tim razvili su RNA Mango, novu tehnologiju sa brojnim korisnim primenama.
Ključne karakteristikeRNA Mango tehnologija zasniva se na specifičnom vezivanju RNA Mango aptamera i dvufunkcionalne boje Thizole Orange (TO). Glavne karakteristike ove tehnologije su snažno vezivanje između boje i aptamera (KD ≈ 3 nM) i oko 1000 puta pojačana fluorescencija boje kada je vezana za Mango aptamer (fluorescentno pojačanje, FE = 1.100).
Boja Thizole Orange (TO) ima i niz drugih poželjnih svojstava, uključujući:
- Malu veličinu.
- Nisku toksičnost.
- Propustljivost kroz plazmatsku i nuklearnu membranu.
- Kratak intracelularni poluživot.
- Mogućnost primene širokog opsega talasnih dužina jednostavnim supstitucijama i izmenama strukture TO.
- TO1 i TO3 boje mogu se koristiti u dvobojnom reporter testu uz RNA Mango i RNA Peach aptamerske sisteme (Kong i sar. 2021).
TO1-biotin je standardna varijanta TO boje za RNA Mango eksperimente.
Transkripcione reakcije izvođene su u zapremini od 300 µL, koristeći T7 RNK polimerazu (400 U, 50 U/µL, Applied Biological Materials), 0,5 µM TO1-3PEG-Biotin (Applied Biological Materials), uz 8 mM GTP, 5 mM CTP i ATP, 2 mM UTP, 40 mM TRIS pufer pH 7,9, 2,5 mM spermidina, 26 mM MgCl2, 20 mM KCl, pirofosfatazu (0,5 U, 0,1 U/µL, ThermoFisher Scientific) i 0,01% Triton X-100. Svakom uzorku je dodata voda (negativna kontrola), 0,33 µM DNK matrica (Mango Transcription) ili 500 nM finalne Mango III A10U RNK (pozitivna kontrola). Uzorci su vizuelizovani u boksu sa plavim svetlom, a video je reprodukovan brzinom od 30×.


